摘要

目的探讨一种简单有效的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离与培养方法。方法取出生24 h以内的大鼠心室,0.08%的胰蛋白酶反复消化多次,离心收集心肌细胞,差速培养后5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化心肌细胞。用全细胞膜片钳方法,记录心肌细胞动作电位,并用激光共聚焦显微镜观察钙瞬变、线粒体膜电位。结果心肌细胞存活率大于93%,心肌细胞纯度大于96%,细胞形态良好,出现节律性搏动,钙瞬变波形稳定、规律,动作电位和线粒体膜电位均正常。结论本研究方法分离心肌细胞存活率高、活性好,是一种简单、高效的心肌细胞原代培养方法,可广泛应用于各种研究。

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