对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖法测定饲用α-半乳糖苷酶(黑曲霉)活力的方法

作者：潘宝海; 李德发; 陆文清; 代建国

来源：中国农业大学学报, 2004, 7(5).

DOI：10.3321/j.issn:1007-4333.2002.05.020

• 对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖
• α-半乳糖苷酶
• 饲用酶制剂
• 检测方法

旨在建立一种适合于测定饲用α-半乳糖苷酶活力的检测方法.实验利用对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖(p-NPG)作为酶反应底物,通过400 nm比色检测酶反应所释放的对硝基酚的量来测定饲用酶制剂中α-半乳糖苷酶的活性.研究表明,反应液中所含的对硝基酚的量大于15 μmol*mL-1时,吸光值超过仪器的检测范围;酶制剂稀释倍数对对硝基酚比色法的影响较小,本底占总酶活的10%～16%,当酶稀释100倍时,本底对酶活的影响最小;在测定酶活反应时间为6 min时,已经有约10%的对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖水解,当酶液的酶活在2.0 U*mL-1以内,测试结果较为准确.考虑到饲用酶制剂的作用环境,建议反应温度为37 ℃、反应体系pH 5.0.

• 出版日期2004
• 单位中国农业大学