科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为建立禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4)临床检测方法，根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物，将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体，构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon，同时对Hexon基因进行分析，选取高度保守区域，设计荧光定量检测引物，建立FAdV4 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。该方法扩增产物长度为95 bp，最低检测下限为7.1×102拷贝/μL，且与其他禽源病毒无交叉反应，批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%，具有良好的特异性和重复性。将建立的检测方法应用于检测FAdV4在鸡肝癌细胞(Leghorn male hepatocellular cells,LMH)上的增殖特性，并与TCID50法测定的病毒滴度进行比较，结果显示，2种检测方法具有良好的相关性。综上，本研究建立的检测方法可用于FAdV4的临床早期快速检测。
