摘要

建立一种基于官方分析化学家协会(Association of Official Analytical Chemists, AOAC)方法检测黑果枸杞及其制品中花青素含量的改进pH示差法。考察了黑果枸杞及其制品中花青素的最佳提取和检测条件,通过液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别出黑果枸杞中花青素的具体化学结构,并计算出混合花青素的平均摩尔质量。通过分光光度法测得混合花青素的平均摩尔消光系数,对改进后的pH示差法进行方法学验证和花青素的含量测定。结果最佳提取和检测条件如下:黑果枸杞花青素提取溶剂为盐酸-80%乙醇(3:97,体积比),料液比为1:100(g:mL),提取温度为50 ℃,提取时间为30 min,缓冲溶液稀释5倍后静置平衡20 min。LC-MS/MS鉴别黑果枸杞中主要以矮牵牛素类花青素为主(占97.96%),黑果枸杞特有的混合花青素平均摩尔质量为912.7 g/mol,平均摩尔消光系数为29 591 L/(mol·cm)。pH示差法改进后满足方法学验证要求,固体样品和液体样品最低检出限分别为28.2 mg/100 g、0.282 mg/100 mL。方法改进后花青素提取增长率均>20%,静置平衡20 min后单次检测结果精密度<0.3%。以矮牵牛素类花青素代替矢车菊素-3-O-葡萄糖苷计算花青素含量平均高了2.41倍,能真实地反映黑果枸杞及其制品中花青素的含量。

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