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摘要
背景:mi RNAs广泛参与蛋白表达的调控,在机体的多种生理和病理过程中发挥重要的作用,但是目前对其在椎间盘退变中的表达谱及发挥的作用知之甚少。目的:比较退变性腰椎侧凸患者与正常对照组椎间盘组织中mi RNAs表达谱的差异,确定退变性腰椎侧凸特异性相关的mi RNAs,并对其进行功能验证。方法:对获取的退变性腰椎侧凸57例患者手术髓核组织和腰椎骨折42例患者正常髓核组织依次进行总RNA提取,其中,各取10例进行miR NA芯片筛查,挑选表达有差异的microR NA。随后,采用RT-q PCR技术对其进行验证。对表达显著差异的mi RNA进行探究。进一步对其进行功能验证,确定其与Ⅱ型胶原表达的关系。运用Western与荧光素酶报告系统进一步确定靶基因。结果与结论:与正常对照相比,22条mi RNA表达存在显著差异(17条表达上调和5条表达下调)。随后进行RT-qP CR验证,与正常对照相比,mi R-491-5p在退变性腰椎侧凸患者椎间盘组织中,表达显著下调。此外,mi R-491-5p表达水平与椎间盘退变评分密切相关。高表达miR-491-5p促进Ⅱ型胶原表达。生物信息学软件证实,基质金属蛋白酶9为miR-491-5p理论上的靶基因。荧光素酶报告系统证实mi R-491-5p影响基质金属蛋白酶9的表达。结果表明,下调的mi R-491-5p通过调控基质金属蛋白酶9,导致椎间盘组织中Ⅱ型胶原的丢失,进而引起椎间盘退变及退变性腰椎侧凸;mi R-491-5p可成为治疗退变性腰椎侧凸的一个新的治疗靶点。
- 出版日期2016
- 单位中国人民解放军第252医院; 保定市第一中心医院
