mTOR信号通路调控结直肠癌LoVo/ADR细胞多药耐药性的可能机制

作者：马强; 常宗宏; 王维; 王彪猛

来源：肿瘤, 2012, (10): 782-788.

• 结直肠肿瘤
• 抗药性,肿瘤
• 信号转导
• mTOR Colorectal neoplasms
• Drug resistance, neoplasm
• Signal transduction
• mTOR

目的:通过雷帕霉素(rapamycin,RAPA)抑制哺乳动物雷帕霉素靶分子(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路,观察结直肠癌多药耐药LoVo/ADR细胞对多柔比星的敏感性、自噬、凋亡及多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,MDR1)表达的变化,探讨mTOR通路调控结直肠癌多药耐药的可能机制。方法:多柔比星联合RAPA作用后,MTT法检测多柔比星对LoVo/ADR细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值;多柔比星和RAPA单独或联合作用后,在透射电子显微镜和荧光显微镜下观察LoVo/ADR细胞自噬体的形成,FCM分析细胞的自噬率和细胞凋亡率;RAPA作用后,RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测LoVo/ADR细胞中MDR1mRNA和P-糖蛋白的表达。结果:25和50μmol/LRAPA作用下,多柔比星对LoVo/ADR细胞的IC50值均低于不加RAPA的对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组LoVo/ADR细胞中很少或几乎看不到自噬体或点状绿色荧光分布,细胞自噬率为(2.9±0.4)%;多柔比星组和RAPA组LoVo/ADR细胞中可见自噬体形成,散在点状绿色荧光分布于细胞质及细胞核周围,细胞自噬率分别为(35.5±5.4)%和(46.7±6.7)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);多柔比星联合RAPA组LoVo/ADR细胞中可见大量自噬体形成,细胞的自噬率为(73.1±7.4)%,显著高于多柔比星或RAPA单独作用组(P<0.05)。RAPA组和多柔比星组的细胞凋亡率分别为(2.06±0.43)%和(48.39±6.47)%,多柔比星组的细胞凋亡率高于对照组(2.23±0.50)%(P<0.05);多柔比星联合RAPA组的细胞凋亡率为(79.43±8.28)%,高于多柔比星组(P<0.05)。RAPA作用后,LoVo/ADR细胞中MDR1mRNA和P-糖蛋白表达下调。结论:抑制mTOR通路具有逆转结直肠癌细胞多药耐药性的作用,其机制可能与RAPA促使耐药细胞自噬、凋亡及下调MDR1mRNA的表达有关。

• 出版日期2012
• 单位中国人民解放军兰州军区兰州总医院