大肠杆菌O157中肽聚糖水解酶MpaA的克隆、表达、纯化及晶体学研究

作者：马银良; 刘爽; 崔亚琦; 康现江; 刘秀华

来源：河北大学学报(自然科学版), 2016, 36(04): 412-416.

• 大肠杆菌O157
• 肽聚糖水解酶
• MpaA
• 晶体

采用分子克隆方法将来源于大肠杆菌O157的mpaA基因构建入pET-21b(+)表达载体.诱导MpaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达,通过Ni亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析三步法纯化得到高纯度蛋白.使用气象扩散法进行蛋白质晶体生长的初步筛选与优化,得到MpaA蛋白质单晶,并使用X射线衍射仪进行衍射数据的收集与处理.MpaA晶体分辨率为0.26nm,属于P31空间群,晶胞参数为a=5.989 3nm,b=5.989 3nm,c=12.987 0nm,β=90.000°.MpaA晶体衍射数据的收集为后续结构解析和催化机制的阐明提供了基础.

• 出版日期2016
• 单位河北大学; 生命科学学院