摘要

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞﹙cytokine-induced killer cell,CIK﹚对荧光素酶标记的人宫颈癌 HeLa-luc 细胞的体内外抗肿瘤作用,了解 CIK 回输荷瘤小鼠后在不同器官的分布特点。 方法:由健康志愿者外周血单个核细胞体外诱导培养 CIK,流式细胞术检测 CIK 表面分子的表达,RT-PCR 法检测 IFN-γ mRNA 的表达,MTT 法和瑞氏-姬姆萨染色测定 CIK 对HeLa-luc 细胞的杀伤作用。建立荷 HeLa-luc 瘤 BALB/c 裸鼠模型,体内成像系统观察荷瘤小鼠肿瘤大小变化及 CIK 治疗效果,共聚焦显微镜观察不同器官中 CIK 的分布情况。 结果:CIK 在体外诱导培养 14 ~ 21 d,其生长达到高峰,此时 CD3 +CD56 + T 细胞的比例增加 50 倍以上,IFN-γ mRNA 表达水平也达到高峰。在效靶比为 20: 1、40: 1时,CIK 对 HeLa-luc 细胞的杀伤率分别为﹙51. 16 ± 2. 64﹚% 、﹙72. 14 ± 4. 21﹚% ,明显高于对照组的﹙16. 33 ± 3. 09﹚% 、﹙21. 26 ± 2. 71﹚% ﹙P < 0. 05﹚。CIK治疗 5 周和 8 周后,对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为 47. 18% 、64. 38% 。CIK 治疗组荷瘤小鼠外周血中 IFN-γ 水平为﹙61. 92 ± 6.49﹚pg/ml,明显高于对照组的﹙34. 30 ± 1. 78﹚pg/ml﹙P < 0. 05﹚。CFSE 标记的 CIK 经腹腔和瘤旁注射入荷瘤小鼠 3 h,在肺、肝、脾、外周血、肿瘤中均可观察到绿色荧光;腹腔途径注射 24 h 时,肿瘤组织中 CIK 浓度达到高峰﹙20. 56 ± 1. 72﹚% ;瘤旁途径注射 3 h 时,肿瘤组织中 CIK 达到高峰﹙25. 75 ± 3. 45﹚% 。结论:CIK 在体内外对宫颈癌 HeLa-luc 细胞均有较强的杀伤作用,CIK 经不同途径注射荷瘤小鼠后可以广泛分布于全身器官,其到达各脏器的浓度与输注途径及时间密切相关。