癌-睾丸抗原GAGE-1基因的重组、表达及纯化

作者：赵飞兰; 李立志; 封毅; 卓少元; 钟卫干; 范蓉

来源：肿瘤防治研究, 2014, (03): 248-251.

• GAGE-1
• 原核表达
• 纯化
• 融合蛋白 GAGE-1
• Prokaryotic expression
• Purification
• Fusion protein

目的为进一步研究临床应用癌-睾丸抗原GAGE-1诱导特异性抗肿瘤免疫反应,对GAGE-1基因进行克隆、体外原核重组表达及蛋白分离纯化。方法运用RT-PCR技术从人QGY-7701肝癌细胞株中扩增GAGE-1基因片段,插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GAGE-1,并导入大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达;经包涵体透析复性及GST柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析鉴定。结果扩增得到GAGE-1基因5’端251 bp片段,与GeneBank公布的序列一致,构建的PGEX-6p-1-GAGE-1原核表达质粒经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达...

• 出版日期2014
• 单位广西壮族自治区民族医院; 广西中医药大学