内切葡聚糖酶基因在穿梭载体中的表达研究

作者：杨荣; 顾明; 夏先林

来源：山地农业生物学报, 2012, (02): 111-115.

DOI：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2012.02.001

• 内切葡聚糖酶基因
• 枯草芽孢杆菌
• 原核表达
• 穿梭表达载体
• 酶学性质 Endoglucanase
• Bacilus subtilis
• Shuttle expression vector
• Prokaryotic expression
• Enzyme properties

将无信号肽编码序列的内切葡聚糖酶基因(GenBankNo.DQ782954)与表达载体PMK4连接后转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-PMK4-egls,并将提取的质粒转化到枯草芽孢杆菌WB600原生质体内,获工程菌WB600-PMK4-egls。同时,通过刚果红染色和SDS-PAGE分析表明,该基因在枯草芽孢杆菌中得到了表达。通过优化培养基因工程菌,胞外上清液中的酶活力达998U,该酶促反应的最适温度为60℃,最适pH为6.0,且pH在4.5～7.5,温度在30℃～65℃范围内,可保持最高酶活的70%以上。

• 出版日期2012
• 单位贵州大学