Ox-LDL对THP-1巨噬细胞迁移功能、microRNA21表达及MAPK通道磷酸化的影响

摘要

目的:探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对THP-1巨噬细胞迁移功能、microRNA21(miR-21)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响。方法:以160nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞。根据是否采用ox-LDL处理及脂质体介导miR-21抑制剂转染THP-1巨噬细胞,分为空白对照组(未进行oxLDL处理及脂质体转染),ox-LDL组(采用50mg/L ox-LDL处理,未进行脂质体转染),miR-21抑制剂组(脂质体介导miR-21抑制剂转染后采用50mg/L ox-LDL处理),miR-21抑制剂阴性对照组(脂质体介导miR-21抑制剂阴性对照转染后采用50mg/L ox-LDL处理)。Transwell法检测THP-1巨噬细胞迁移数,实时定量PCR检测miR-21表达情况,Western-blot法检测双特异性磷酸-8(DUSP-8)表达水平及磷酸化水平。结果:与空白对照组比较,ox-LDL组THP-1巨噬细胞迁移数显著增加[(74.10±15.10)比(184.10±26.28)],miR-21表达水平[(1.00±0.21)比(2.02±0.27)],MAPK通路的JNK、P38蛋白磷酸化水平显著升高,DUSP-8蛋白表达水平降低,P均<0.01;与ox-LDL组比较,miR-21抑制剂组THP-1巨噬细胞迁移数[(184.10±26.28)比(58.50±10.24)]显著减少,miR-21表达水平[(2.02±0.27)比(0.66±0.16)],JNK、P38蛋白磷酸化水平显著降低,DUSP-8蛋白表达水平显著升高,P均<0.01。结论:ox-LDL增强巨噬细胞迁移能力,可能与其上调miR-21表达、增强MAPK通路的JNK、P38蛋白磷酸化、降低DUSP-8表达有关。

关键词