油葵三个HaLPAAT2基因的克隆、序列分析及活性鉴定

作者：王岚; 达红玉; 周至铭; 张程; **宝; 孙黎^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, Z1: 2208-2215.

DOI：10.13417/j.gab.040.002208

• 油葵
• HaLPAAT
• 生物信息学
• SM2-1突变体

溶血磷脂酸酰基转移酶基因(lysophosphatideacid acyltransferases gene, LPAAT)是油脂合成的关键基因之一,其催化溶血磷脂酸合成磷脂酸,是高等植物Kennedy途径中的关键酶。本研究从油葵(Helianthus annuus)中克隆得到3个HaLPAAT2基因,分别命名为HaLPAAT2.1,HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3。对这3个HaLPAAT2进行了生物信息分析并将其转入SM2-1大肠杆菌突变体中验证LPAAT活性。结果表明:HaLPAAT2.1、HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3基因全长分别为1 158、1 137、1 149 bp,分别编码385、378、382个氨基酸。预测3个基因的编码蛋白都含有LPLAT superfamily酰基转移酶结构域。跨膜结构分析显示这3个HaLPAAT2蛋白都含有3个跨膜结构域。亚细胞定位预测这3个蛋白都位于内质网上。对其理化性质分析表明这3个HaLPAAT2均为不稳定性蛋白。构建了HaLPAAT2.1、HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3基因的原核表达载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)功能缺失突变体SM2-1进行功能验证。互补试验表明,3个HaLPAAT2基因都具有大肠杆菌LPAAT活性,可以互补大肠杆菌LPAAT突变体SM2-1菌株的活性。

• 出版日期2021
• 单位生命科学学院; 石河子大学