绿僵菌Argonaute基因片段原核表达载体的构建及其表达

作者：汪章勋; 孟慧敏; 周权

来源：安徽科技学院学报, 2013, (06): 39-43.

• 绿僵菌
• Argonaute基因
• 原核表达 M.anisopliae
• Argonaute gene
• Prokaryotic expression

绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌。研究表明小RNA能够调控基因的表达,其中Argonaute基因在整个小RNA通路中发挥重要的作用。本研究通过RT-PCR的方法从绿僵菌中获得了Argonaute基因的部分功能片段,构建了其重组原核表达载体,将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表达;采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Western blot技术鉴定。结果发现:通过RT-PCR的方法获得长度约为950bp的基因片段;重组原核表达载体经诱导表达后,SDS-PAGE检测发现分子量约为34kDa的目的蛋白条带;诱导5h后蛋白的表达量最高,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,经Western blot...

• 出版日期2013
• 单位安徽农业大学