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摘要
目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）调神经磷酸酶（CaN）信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5 mRNA和蛋白表达调控中的作用。方法:分离1日龄SD乳大鼠心室获心室肌细胞,分为对照（control）组、苯肾上腺素（PE）组、氯沙坦（Los）+PE组和环孢素A（CsA）+PE组;重组腺病毒shRNA干扰载体介导CaN A亚基β亚型（CnAβ）基因沉默分为腺病毒空载体（Ad-Null）组、Ad-Null+PE组、重组腺病毒CnAβshRNA1（AdCnAβshRNA1）组和Ad-CnAβshRNA1+PE组。实时荧光定量逆转录PCR检测脑钠尿肽（BNP）、β-肌球蛋白重链（β-MHC）和Nav1.5的mRNA表达。Western blot法检测全细胞提取蛋白CnAβ和Nav1.5的表达。结果:PE干预24 h明显增加心室肌细胞蛋白/DNA比值、细胞BNP和β-MHC的mRNA表达以及细胞面积;上调CnAβ蛋白表达,下调Nav1.5蛋白表达。CsA和Los干预明显抑制PE干预的上述效应。PE下调Nav1.5的mRNA表达,但Los和CsA不能抑制此种效应。Ad-CnAβshRNA1沉默乳鼠心室肌细胞CnAβ基因抑制了PE对BNP mRNA的上调作用,抑制了PE对Nav1.5蛋白表达的下调作用。结论:AT1R-CaN信号通路参与调控培养的乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达的调控。
- 出版日期2017
- 单位贵州医科大学
