大豆高盐胁迫下根部组织酵母双杂交文库的构建与分析

作者：何晓兰; 许玲; 徐照龙; 卫陪陪; 刘晓庆; 黄益洪; 张大勇

来源：上海农业学报, 2013, (06): 20-23.

• 大豆
• 根
• 酵母双杂交文库
• 耐盐性
• 互作蛋白 Soybean
• Root
• Yeast two-hybrid system
• Salt tolerance
• Interaction proteins

为了高效研究大豆耐非生物胁迫的分子调控网络,运用SMART(Switching Mechanism at 5'End of the RNA Transcript)与DSN(Duplex-Specific Nulease)相结合的技术构建了栽培大豆高盐胁迫下根部组织的酵母双杂交cDNA文库。提取高质量的总RNA,利用Oligo(dT)_(16)引物反转录合成cDNA后,经DSN处理,然后利用Advantage 2聚合酶进行长片段PCR扩增,电泳检测显示,产物均一,无高丰度条带,片段范围在0.75~5.00 kb;RT-PCR结果显示,GmActin基因在均一化后表达明显降低,表明均一化效果较好;...

• 出版日期2013
• 单位南京农业大学; 江苏省农业科学院