内蒙古地区乳样中牛支原体的分离及PCR鉴定

作者：许金朋; 黄海碧; 王晓晖; 郝永清

来源：动物医学进展, 2015, 36(04): 24-27.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2015.04.006

• 牛支原体
• 乳房炎
• 牛乳
• Chelex-100法
• PCR鉴定

为检测内蒙古地区某牛场患乳房炎的奶牛乳样中是否存在牛支原体,同时建立直接提取乳样中牛支原体DNA进行PCR检测的方法,本研究无菌采集乳房炎乳样,通过支原体的分离培养、形态学观察和生化试验,初步鉴定分离株为牛支原体,然后提取液体培养基菌体DNA进行牛支原体特异性PCR鉴定,同时,采用Chelex-100法直接提取原乳样中菌体DNA进行PCR鉴定,并测序分析扩增片段序列。液体培养物提取DNA与Chlex-100法直接提取原乳样菌体DNA进行特异性PCR均扩增出目的条带,该片段序列与GenBank中牛支原体oppD/oppF基因的同源性达到99.8%,证实分离株为牛支原体。说明Chlex-100法可直接提取乳样中牛支原体DNA进行快速PCR鉴定。

• 出版日期2015
• 单位内蒙古农业大学