敲低circ＿0000620表达对肺腺癌A549细胞凋亡和顺铂敏感性的影响

作者：李向梅; 王云飞; 王华启^*

来源：郑州大学学报(医学版), 2023, 58(02): 169-174.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2022.05.079

• 肺腺癌
• circ＿0000620
• 细胞凋亡
• 顺铂敏感性

目的:探讨敲低circ＿0000620表达对肺腺癌A549和顺铂耐药A549(A549/DDP)细胞凋亡和顺铂敏感性的影响。方法:设计针对circ＿0000620的siRNA靶序列，分别构建敲低circ＿0000620表达的A549和A549/DDP细胞株(实验组),并构建感染sh-NC(阴性对照)的细胞株(对照组),qRT-PCR检测circ＿0000620表达量，验证敲低效果。敲低circ＿0000620后，利用CCK-8方法检测顺铂对各组细胞活力的影响，并计算顺铂药物半数抑制浓度(IC50);利用Caspase-3/7活性和Tunel方法检测敲低circ＿0000620表达后A549和A549/DDP细胞的凋亡率。利用敲低circ＿0000620表达后A549和对照A549细胞接种BALB/c裸鼠，7 d成瘤后，腹腔注射顺铂(2 mg/kg)进行药物干预，观察肿瘤的生长曲线，28 d后处死裸鼠，称量瘤重。结果:qRT-PCR筛选得到有效抑制circ＿0000620表达的siRNA靶序列(siRNA-2 5’-GAAGAATGATATCCTTGGAAC-3’),并用于后续实验。顺铂敏感性实验结果显示实验组IC50降低，顺铂敏感性增加(P<0.05)。细胞凋亡实验结果显示，敲低细胞circ＿0000620表达，实验组细胞Caspase-3/7活性升高，凋亡率升高，顺铂敏感性增加(P<0.05)。顺铂干预裸鼠荷瘤实验结果显示，与对照组相比，实验组瘤体体积和瘤重明显降低(P<0.05)。结论:筛选得到有效抑制circ＿0000620表达的siRNA靶序列；敲低circ＿0000620的表达可提高细胞对顺铂的敏感性。

• 出版日期2023
• 单位郑州大学; 郑州大学第一附属医院