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摘要
目的 构建慢病毒表达载体LV-APE1-shRNA,观察其介导的RNA干扰对人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H中APE1基因mRNA和蛋白的表达的影响,并进行功能学检测分析,为进一步探讨APE1在肝癌侵袭和转移中的作用机制提供理论基础和实验依据。 方法 设计4对干扰靶序列,分别与pGCSIL-GFP载体连接、转化、并测序鉴定,将重组质粒命名为KD1~KD4。通过Western blot筛选最有效的靶点,将筛选到的重组质粒与pHelper 1. 0,pHelper2. 0共转染293T细胞,包装生产慢病毒颗粒并测定其病毒滴度。将包装产生的慢病毒颗粒感染M...
- 出版日期2010
- 单位福建医科大学
