慢病毒载体介导稳定表达CD163的PAM细胞系的建立及对PRRSV感染的研究

作者：王向鹏; 魏蕊芳; 肖书奇; 周恩民

来源：畜牧兽医学报, 2013, (11): 1797-1804.

• CD163
• 慢病毒载体
• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 猪肺泡巨噬细胞 CD163
• lentiviral vector
• porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• porcine alveolar macrophage

本研究旨在通过慢病毒载体系统将猪源CD163转染入永生化的猪肺泡巨噬细胞(PAM)系(CRL-2843),建立稳定表达CD163的PAM细胞系(PAM-CD163)及验证该细胞系对PRRSV的易感性。用PCR方法从pJET1.2-CD163载体上扩增CD163基因编码区,通过酶切连接构建慢病毒表达载体pTrip-CMV-CD163-IRESpur。将该质粒与慢病毒包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293-T细胞,包装表达CD163的慢病毒。将收获的慢病毒在Polybrene的介导下转导至永生化PAM细胞,采用嘌呤霉素筛选和细胞有限稀释法筛选出稳定表达CD163的PAM细胞系。应用得到的细...

• 出版日期2013
• 单位西北农林科技大学