摘要

目的建立一种基于量子点流式微球技术检测胃癌相关抗原MG7的方法,并对该方法进行评价。方法将兔抗人MG7多克隆抗体与5μm聚苯乙烯微球耦联,与MG7结合,加入鼠抗人MG7单克隆抗体,最后加入生物素化羊抗鼠Ig G和链霉亲合素化量子点,通过流式细胞仪检测量子点平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI)。对该方法的灵敏度、线性范围、精密度、干扰实验、阳性临界值等指标进行初步评价,并检测19例胃癌、23例胃溃疡、25例浅表性胃炎、21例萎缩性胃炎/增生患者和25例体检健康者血清MG7水平。结果聚苯乙烯微球粒径均一性好,2 h为最佳耦联时间,耦联率为67.43%。方法检测灵敏度为0.21 ng/m L,线性范围为0.39100 ng/m L。体检健康者混合血清及胃癌组混合血清的变异系数分别为10.43%和7.87%。低浓度胆固醇(6.50 mmol/L)、胆红素(0.15 mmol/L)和三酰甘油(18.00 mmol/L)对检测干扰较小。ROC曲线下面积(AUCROC)为0.922,最佳临界值为15.00 ng/m L。胃癌组血清MG7浓度显著高于体检健康组、浅表性胃炎组、胃溃疡组、萎缩性胃炎/增生组(P均<0.01);萎缩性胃炎/增生组MG7浓度显著高于体检健康组、浅表性胃炎组、胃溃疡组(P均<0.01);胃溃疡组MG7浓度高于体检健康组(P<0.05);以15.00 ng/m L为临界值时,胃癌阳性检出率为73.68%。结论本实验建立的量子点流式微球技术可用于血清胃癌相关抗原MG7的定量测定,其检测性能良好,检测结果与临床疾病发展规律相符合。

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