麻疹核蛋白基因的表达及检测应用的研究

作者：陈寅; 卢亦愚; 冯燕; 严菊英; 茅海燕; 张严峻

来源：中国卫生检验杂志, 2009, (05): 1078-1080.

• 麻疹病毒
• 核蛋白
• 原核表达
• Westernblot
• ELISA Measles virus
• Nucleoprotein
• Expression
• Western blot
• ELISA

目的:构建麻疹病毒核蛋白基因的原核表达系统,使其在大肠杆菌中高效表达,并确定表达产物在麻疹抗体检测中的应用价值。方法:提取麻疹流行株基因组RNA,RT-PCR扩增核蛋白基因并克隆入T载体中,测序正确后亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;利用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白表达情况和免疫原性;通过Ni-NTA亲和层析获得的高纯度目的蛋白用于ELISA检测。结果:RT-PCR获得的核蛋白基因全长1578 bp。大肠杆菌表达产物在SDS-PAGE中出现大约62 kDa的特异条带,且主要以可溶性形式存在。West-ern blot显...

• 出版日期2009
• 单位浙江省疾病预防控制中心