索科线虫RAPD反应条件优化

作者:徐芬; 王国秀; 查玉平; 刘朋; 曹文博
来源:华中师范大学学报(自然科学版), 2006, (03): 412-415.

摘要

以中华卵索线虫为材料,研究索科线虫DNA的提取以及对RAPD的影响因素,包括模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq聚合酶浓度等,探索最佳反应条件,构建了适于索科线虫RAPD分析的稳定的反应体系.25μL反应体系中,含模板DNA20~40 ng,10×PCR缓冲液2.5μL,MgCl22.0 mmol/L,dNTP 150μmol/L,引物0.3μmol/L,Taq聚合酶1U.实验证明,在对索科线虫进行RAPD分析时,采用优化的反应条件,规范实验操作,使用同厂家同批次的试剂,实验结果就会具有很好的重复性和稳定性.