安祖花ISSR-PCR反应体系的优化和确立

作者：杨京燕; 葛亚英; 田丹青

来源：江苏农业科学, 2014, (06): 38-40.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2014.06.175

• 安祖花
• ISSR
• 单因素试验
• 体系优化

为建立适宜安祖花DNA的ISSR-PCR扩增体系,采用单因子试验对影响ISSR-PCR反应的各组分(Taq DNA聚合酶、模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度)进行了优化,确立了适合安祖花的条带清晰、多态性高、重复性好的最佳ISSR-PCR反应体系,即在20μL PCR反应体系中含有10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq酶0.2μL、10μmol/L引物3.0μL、20 ng/μL模板2.0μL;并利用2条引物对15个安祖花品种进行了稳定性鉴定,为安祖花的遗传多样性分析及育种工作提...

• 出版日期2014
• 单位浙江省农业科学院