基于DNA修复酶识别的电化学发光定量检测8-羟基脱氧鸟苷

作者：高越; 王婷; 张清政; 石三俊; 黄荣富^*

来源：分析试验室, 2023, 1-7.

• 8-oxodG
• DNA修复酶
• 电化学发光
• DNA扩增
• Ru-dppz

构建了一种无标记且高灵敏的电化学发光(ECL)定量检测双链DNA(dsDNA)膜中8-羟基脱氧鸟苷(8-oxodG)的新方法。利用8-氧代鸟嘌呤DNA糖基酶(Fpg)特异性识别剪切8-oxodG产生脱碱基位点，脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE 1)水解此处磷酸二酯键。在末端转移酶(TdT)的作用下，与脱氧腺苷三磷酸(dATP)反应后在3-’OH端形成poly-dA，再经与poly-T20互补配对，在电极表面形成大量dsDNA。选用“光开关”分子Ru-dppz嵌入dsDNA产生电化学发光信号，实现对8-oxodG的定量检测。在最佳实验条件下，本方法可在560个正常碱基中检测出1个损伤碱基产物8-oxodG，检出限低至1.1×10-16 mol。

• 出版日期2023
• 单位化学化工学院; 成都理工大学