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摘要
学习记忆在动物获得新的觅食技巧和食物偏好方面扮演着重要的角色。为评估学习记忆对翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)摄食调控的影响,构建翘嘴鳜学习记忆相关基因c-fos及zif268荧光过表达载体,并以pcDNA3.1-EGFP载体质粒中的绿色荧光蛋白基因为报道基因进行电转实验,优化电压、脉冲时间、质粒浓度和电击次数等电转条件,确立最佳条件。利用电击的方式转染翘嘴鳜脑细胞,检测食欲基因mch、agrp、pomc、npy表达变化。结果显示,成功构建了学习记忆过表达载体pcDNA3.1-c-fos-EGFP、pcDNA3.1-zif268-EGFP。翘嘴鳜脑细胞电转染的最适条件:细胞密度1×106/mL、电压240 V、脉冲时间5 ms、质粒6μg、电击1次、转染48 h,可见大部分荧光蛋白表达,转染率较高,表明pc DNA3.1-EGFP在体外成功转染翘嘴鳜脑细胞。过表达c-fos基因后,食欲相关基因pomc和npy m RNA水平均显著上升。而过表达zif268基因后,并未发现食欲基因有差异表达。以上结果说明,翘嘴鳜学习记忆相关基因c-fos的表达影响了食欲相关基因pomc和npy的表达。
- 出版日期2021
- 单位华中农业大学; 安徽省农业科学院水产研究所
