克百威单克隆抗体的制备及鉴定

作者：朱江; 陆贻通

来源：科技通报, 2005, 21(05): 536-540+544.

DOI：10.3969/j.issn.1001-7119.2005.05.009

• 克百威
• 单克隆抗体
• 杂交瘤技术
• 酶联免疫吸附测定法

本试验以人工合成的克百威免疫原免疫BALB/C F1小鼠,采用杂交瘤技术制备了5株能稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用培养扩增后的各建株细胞诱导小鼠生长腹水,腹水效价达10-6￣10-7。琼脂双扩试验表明各单抗蛋白均为IgG,抗体蛋白均为IgG2a亚类。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体腹水,并测定抗体蛋白含量为3￣8 mg/mL;用SDS-PAGE进行纯度鉴定,电泳图谱均显示了IgG抗体及其重链和轻链条带,分离的抗体纯度在90%以上。对纯化的单抗5E2进一步做交叉反应试验,与其他氨基甲酸酯类杀虫剂残杀威、速灭威、灭多威、甲奈威、异丙威、仲丁威的交叉反应率分别为7.2%、4.5%、2.8%、7.9%、9.5%、8.9%,结果表明单抗5E2有较好的特异性。

• 出版日期2005
• 单位上海交通大学