摘要
酰化高丝氨酸内酯类(Acyl-homoserine lactones,AHLs)化合物是革兰氏阴性菌群体感应系统中最重要的一类信号分子,本文模拟淡水鱼革兰氏阴性腐败菌产生的5种主要AHLs(C4-HSL、C6-HSL、C8-HSL、C10-HSL和3OC12-HSL)。通过构建Ana-1和RAW 264.7两种巨噬细胞模型,筛选敏感识别特定AHLs的巨噬细胞株,为构建基于细胞传感的淡水鱼腐败菌的检测方法进行前期初步研究。结果表明,5种AHLs均能造成Ana-1和RAW 264.7细胞的活性降低;胞内Ca2+荧光检测发现,在C10-HSL的刺激作用下,Ana-1细胞的活性与胞内Ca2+水平变化呈现一定的相关性,由此推测C10-HSL具有诱导Ana-1细胞胞内Ca2+上升,进而引发细胞内钙离子探针的荧光反应。同时采用流式细胞术和电镜分析对Ana-1细胞识别C10-HSL的敏感性进行了验证,为构建基于Ana-1细胞的淡水鱼腐败菌信号分子C10-HSL的荧光传感检测方法提供了前期研究基础。
- 出版日期2017
- 单位扬州大学