牙鲆(Paralichthys olivaceus)β诺达病毒衣壳蛋白重组表达及复性条件优化

作者：蒋嫣冉; 张亦陈; 刘逸尘; 耿绪云; 孙金生

来源：海洋与湖沼, 2014, (02): 370-375.

• 牙鲆
• β诺达病毒
• 重组表达
• 复性优化 Paralichthys olivaceus
• Betanodavirus
• recombinant expression
• optimization of refolding

β诺达病毒利用其缺乏校正功能的聚合酶进行基因组复制,易导致突变,因而具有广泛的宿主感染性,而且可引发致死率极高的病毒性神经坏死症,需要有针对性地研究检测及防御方法。本研究以感染牙鲆(Paralichthys olivaceus)的β诺达病毒为对象,利用引物设计,将His标签编码序列连接到完整病毒衣壳蛋白C端,构建原核表达载体;采用SDS-PAGE及质谱对表达产物进行分离和鉴定;重组衣壳蛋白经镍离子亲和柱纯化后进行复性条件的正交优化。结果表明4个肽段经质谱鉴定与预期一致;纯化产物产量可达36mg/L;4°C条件下,复性缓冲液中尿素和PBS的最适浓度为0.8mol/L和0.05mol/L。本研究建...

• 出版日期2014
• 单位天津师范大学; 天津市水生动物疫病预防控制中心