大鼠背根神经节神经元原代培养中纯化方法的改良

作者:李晓丽; 张石波; 孙晓婷; 易剑锋; 郭可盈; 高小东; 李人杰; 强亮; 丁斐; 施海燕
来源:南通大学学报(医学版), 2015, (04): 257-260+254.
DOI:10.16424/j.cnki.cn32-1807/r.2015.04.001

摘要

目的 :改进大鼠背根神经节神经元原代培养中的纯化方法以提高细胞纯度。方法 :常规取材并酶解消化大鼠背根神经节神经元,应用牛血清白蛋白溶液对细胞进行密度梯度离心初步分离细胞,再应用差速贴壁法去除非神经元细胞,最后应用阿糖胞苷进一步纯化细胞。纯化后应用显微镜观察细胞形态,采用β-tubulinⅢ免疫细胞化学染色方法进行纯度鉴定,应用CCK-8检测细胞活力。结果:未改良组获得纯化的背根神经节神经元的培养周期长达10 d,而改良组缩短为5 d。相差显微镜可见改良组神经胶质细胞明显减少。改良组的β-tubulinⅢ免疫细胞化学染色阳性细胞比例显著增加,计数结果显示改良组神经元纯度达到93%,未改良组纯度...

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