Smac调控Caspase-3对耐药肺腺癌细胞株生物活性及相关信号的研究

作者：陈康; 苟安栓^*; 朱佳; 刘凯; 周跃嫔

来源：现代生物医学进展, 2022, 22(21): 4027-4034.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2022.21.005

• Smac基因
• Caspase-3
• 紫杉醇耐药
• 肺腺癌
• 生物活性
• 经典凋亡信号通路

目的：探讨Smac基因调控Caspase-3表达对紫杉醇耐药肺腺癌细胞株生物活性及经典凋亡信号通路的作用机制。方法：取构建好的耐药A549细胞，将其分为A549细胞（LC）组、A549细胞+Smac-NC(SN)组、A549细胞+Smac抑制剂（SI）组、A549细胞+Smac激动剂（SM）组、A549细胞+Caspase-3-NC(CN)组、A549细胞+Caspase-3抑制剂（CI）组、A549细胞+Caspase-3激动剂（CM）组、A549细胞+Smac激动剂+Caspase-3激动剂（MM）组；Real-time PCR法检测正常肺上皮细胞及4种肺腺癌细胞系中Smac、Caspase-3表达水平，将阴性对照、Smac、Caspase-3类似物转染至紫杉醇耐药肺腺癌细胞株，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，免疫印迹法检测经典凋亡信号通路表达，并分析Smac与Caspase-3的相关性。结果：肺腺癌细胞系中的Smac、Caspase-3 m RNA表达量显著低于正常肺上皮细胞系BEAS-2B (P<0.05)，其中A549的Smac、Caspase-3 m RNA值最小（P<0.05），因此选取其作为此次实验细胞；LC组与SN组相比，细胞增殖率、凋亡率及Caspase-3、Bcl-2、Bax、Cyto-C蛋白表达基本无差异（P>0.05），与SN组相比，SI组细胞凋亡率及Caspase-3、Bax、Cyto-C蛋白表达明显降低（P<0.05），增殖率、Bcl-2表达明显升高（P<0.05），与SI组相比，SM组细胞凋亡率及Caspase-3、Bax、Cyto-C蛋白表达明显升高（P<0.05），增殖率、Bcl-2表达明显降低（P<0.05）;LC组与CN组相比，细胞增殖率、凋亡率及Caspase-3、Bcl-2、Bax、Cyto-C蛋白表达基本无差异（P>0.05），与CN组相比，CI组细胞凋亡率及Caspase-3、Bax、Cyto-C蛋白表达明显降低（P<0.05），增殖率、Bcl-2表达明显升高（P<0.05），与CI组相比，CM组细胞凋亡率及Caspase-3、Bax、Cyto-C蛋白表达明显升高（P<0.05），增殖率、Bcl-2表达明显降低（P<0.05）;SM组与CM组相比，细胞增殖率、凋亡率及Caspase-3、Bcl-2、Bax、Cyto-C蛋白表达基本无差异（P>0.05），与CM组相比，MM组细胞凋亡率及Caspase-3、Bax、Cyto-C蛋白表达明显升高（P<0.05），增殖率、Bcl-2表达明显降低（P<0.05）;Smac与Caspase-3呈现正相关（r=0.470,P=0.002），组间具有显著差异。结论：Smac基因可显著改善紫杉醇耐药肺腺癌细胞株细胞生物活性，并激活经典凋亡信号通路，其作用机制可能与调控Caspase-3表达有关。

• 出版日期2022
• 单位新疆维吾尔自治区人民医院