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摘要
目的 探讨热休克蛋白70羧基末端反应蛋白(CHIP)介导的8-氧代鸟嘌呤-DNA糖基化酶(OGG)1在老年性白内障发展过程中的作用。方法 培养SRA01/04永生化人晶状体上皮细胞，分为空白对照组、空载体质粒转染组、CHIP过表达质粒转染组、细胞氧化损伤模型组。免疫沉淀实验检测OGG1蛋白的泛素化修饰及与E3泛素连接酶CHIP的结合能力。使用手持中波紫外线检测灯照射建立细胞氧化损伤模型，通过转染CHIP质粒提升其表达，Western印迹检测细胞中OGG1蛋白表达变化。结果 免疫沉淀实验结果显示，晶状体上皮细胞中存在OGG1蛋白的泛素化修饰；UbiBrowser软件预测CHIP可能是引发OGG1泛素化修饰的E3泛素连接酶。Western印迹检测结果显示，CHIP能够与OGG1相互结合，提示OGG1可能参与了OGG1蛋白的泛素化修饰过程。在中波紫外线照射10 min时，晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显低于其他中波紫外线照射时间；在中波紫外线照射20～40 min时，随着照射时间的增加，晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量逐渐增加，差异有统计学意义(P<0.05)。根据后续实验建立的细胞氧化损伤模型均选用中波紫外线照射10 min后，再孵育24 h。CHIP过表达质粒转染组晶状体上皮细胞中CHIP蛋白相对表达量明显高于空载体质粒转染组和空白对照组(P<0.05);细胞氧化损伤模型组晶状体上皮细胞中OGG1蛋白相对表达量明显高于空白对照组(P<0.01);CHIP过表达质粒转染组上述指标明显低于细胞氧化损伤模型组、空载体质粒转染组(P<0.05)。结论 E3泛素连接酶CHIP可诱发OGG1泛素化降解，造成晶状体上皮细胞中损伤性DNA聚集，导致老年性白内障的发生与发展。
