摘要

研究目的: 随着我国人口老龄化的加剧,延缓衰老成为医学工作者的重要任务,特别是对脑功能减退的改善是延缓衰老的重要研究方向。本课题通过D-半乳糖注射建立小鼠衰老模型,探讨艾炷灸延缓脑衰老的作用机制。 方法: 先后两批次用Morris水迷宫筛选三月龄体重30±2克的健康雄性小鼠72只。编号后,分为六组进行水迷宫实验。实验造模时,按随机区组设计将72只小鼠分为:生理组盐水组(简称生理组)、造模组、艾炷灸足三里、悬钟穴组(简称艾灸1组)、艾炷灸关元、百会穴组(简称艾灸2组)、电针足三里、悬钟穴组(简称电针组)、尼莫地平灌胃组(简称尼莫地平组)六组。造模组和各干预治疗组以D半乳糖按120mg/kg/d颈背部皮下注射,连续42天,同时生理组颈背部皮下注射等量的生理盐水42天。造模第13天开始艾柱灸、电针、尼莫地平灌胃治疗,隔天一次,各组共15次。生理组和造模组不做任何治疗性干预,但给予与各治疗组同样时间、同等程度的捉抓,造模、治疗结束后,再次行迷宫行为学检测后断头处死,取脑固定,或脑组织匀浆。另取6只18月龄自然衰老小鼠与模型组做组织形态学比较。主要观察指标有: (1)电脑采集各组小鼠造模治疗前后Morris水迷宫行为学指标,包括定位航行实验的指标:“潜伏期”、“寻求次数”、“停留时间”、“平台象限百分比(简称平台象比)”和空间探索实验指标:“原平台象限百分比(简称原象比)”、“跨台次数”; (2)各组小鼠造模治疗后大脑组织光镜下病理形态学变化、神经元密度; (3)各组小鼠造模治疗后大脑皮质电镜下超微结构变化; (4)各组小鼠造模治疗后大脑组织NO含量变化; (5)各组小鼠造模治疗后大脑组织TNOS、iNOS活力变化; (6)各组小鼠造模治疗后大脑组织总SOD、CuZnSOD活力变化; (7)各组小鼠造模治疗后大脑皮质c-fos的表达; (8)各组小鼠造模治疗后大脑皮质p16的表达; (9)各组小鼠造模治疗后大脑皮质Rb的表达; (10)各组小鼠造模治疗后大脑皮质、海马CA3区原位杂交c-fosmRNA的表达。 结果: (1)造模、治疗前六组小鼠的学习记忆能力一致,无差别。实验后,①造模组与其他五组相比,“潜伏期、寻求次数、停留时间、平台象比、跨越次数、原象比”六项...