口蹄疫病毒群特异性RT-LAMP检测技术的建立及试用

作者：谢佳芮; 寇美玲; 苗海生^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(03): 119-126.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.03.022

• 口蹄疫病毒
• 环介导等温核酸扩增
• 群特异性引物

为实现对口蹄疫病毒(FMDV)感染的现场快速检测，本研究于GenBank下载全球具有代表性的107条血清O型、A型和Asia-1型FMDV基因组序列，截取并比对FMDV高度保守的3D(RNA聚合酶)基因序列，设计17套环介导等温扩增引物，并对反应体系和反应条件进行优化，建立FMDV群特异性RT-LAMP技术。该技术在反应前用石蜡密封PicoGreen染料，实现了免开盖可视化判定检测结果；该技术对PRV、PRRSV、AKAV、BTV-1、BTV-16、EHDV、CHUV等偶蹄动物病毒未见非特异性扩增；最低可检测3.4×10-6 ng/μL的病毒RNA，灵敏度是RT-qPCR技术的10倍，是一步法RT-PCR的100倍；尝试应用RT-LAMP对94份RNA临床样品进行检测比对，该检测方法与RT-PCR方法和RT-qPCR方法对临床样品检测的符合率均为82.8%。本研究建立的FMDV群特异性RT-LAMP快速核酸检测技术，具有准确性高、快速简便的优点，可用作家畜FMDV早期感染的现场诊断技术。

• 出版日期2022
• 单位云南省畜牧兽医科学院