改进型颈动脉注射法构建裸鼠脑转移瘤模型

作者：赵峰; 夏学巍; 付红红; 林雯; 董玲; 李亚洲; 杨林杰^*; 吕良^*

来源：中国现代应用药学, 2021, 38(13): 1543-1549.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2021.13.002

• 肝癌
• 脑转移
• 颈内动脉注射
• 动物模型
• 活体成像

目的建立桡足类超绿色荧光蛋白(copepod super green fluorescent protein,copGFP)与纳米荧光素酶(nano luciferase,Nluc)标记的MHCC97-H人肝癌细胞株,通过改进型颈动脉注射法构建应用小动物活体成像系统观察的裸鼠脑转移模型。方法使用携带目的基因的慢病毒载体质粒通过磷酸钙法转染293FT细胞,包装慢病毒后感染MHCC97-H细胞,经嘌呤霉素筛选感染阳性细胞,通过有限稀释法纯化得到稳定表达copGFP及Nluc的单克隆细胞株。通过改进型颈动脉注射法构建裸鼠脑转移模型,应用活体成像系统监测颅内转移灶生长情况。结果成功建立了copGFP与Nluc标记的MHCC97-H肝癌细胞稳定株。分别使用稳定株与原始株细胞通过改进型颈动脉注射法造模,2组荷瘤裸鼠体质量变化及生存曲线无统计学差异,使用稳定株造模裸鼠可通过活体成像系统实时监测到脑转移的形成,所检测生物发光信号强度随肿瘤生长逐渐增强。结论经copGFP与Nluc标记的MHCC97-H人肝癌细胞通过改进型颈动脉注射法成功构建裸鼠脑转移模型,可通过活体成像系统进行无创、连续可视化监测,为肝癌脑转移机制的研究及治疗药物的研发提供理想的动物模型。

• 出版日期2021
• 单位广西医科大学第一附属医院; 桂林医学院附属医院; 桂林医学院