Dual-RMCE介导的T细胞受体基因置换系统的建立

作者：龚英; 黄乙涓; 刘泽龙; 成凉; 彭晋; 刘建中; 李亮平

来源：中国细胞生物学学报, 2015, 37(11): 1481-1489.

DOI：10.11844/cjcb.2015.11.0238

• 肿瘤T细胞治疗
• TCR基因转移
• TCRαβ基因
• Dual-RMCE

抗肿瘤T细胞受体(T cell receptor,TCR)基因治疗在临床上已获得了巨大进展,但仍然存在一些技术瓶颈。例如,内外源性TCR链随机组合形成自身反应性TCR分子、外源基因随机插入导致抑癌基因灭活等。为解决这些问题,作者提出建立低/单拷贝TCR基因置换技术:即结合逆转录病毒和重组酶介导的盒式交换(recombinase mediated cassette exchange,RMCE)技术,实现TCR基因定点置换以构建TCR稳定表达系统。首先,通过逆转录病毒转导在16.113和Jurkat76细胞引入了含有lox P和FRT位点的EGFP(enhanced green fl uorescent protein)基因;然后,利用RMCE方法将EGFP置换成MAGE-A1的TCRαβ基因,置换效率高达5%。在Jurkat76细胞表面检测到了TCR和CD3分子,并能与MAGE-A1特异性HLA-A2多聚体结合。预计利用这一TCR基因置换系统结合干细胞技术可快速产生抗原特异性的T细胞,为TCR-T细胞治疗的安全应用提供一个新策略。

• 出版日期2015
• 单位中山大学中山医学院; 暨南大学