橡胶树尖孢炭疽菌绿色荧光蛋白(GFP)标记转化株的获得

作者:林春花; 刘先宝; 蔡吉苗; 李超萍; 李继锋; 黄贵修
来源:热带作物学报, 2009, 30(10): 1495-1500.
DOI:10.3969/j.issn.1000-2561.2009.10.020

摘要

建立了根癌农杆菌介导转化橡胶树尖孢炭疽菌(Collectotrichum acutatum)获得T-DNA插入突变体的体系:在尖孢炭疽菌孢子浓度106个/mL、农杆菌浓度OD600=0.15~0.2后在200μmol/mL的乙酰丁香酮(AS)诱导6h,共培养48h,转化效率可达150~300个/106个分生孢子。获得的转化子通过PCR检测绿色荧光蛋白基因、Southern杂交验证、分生孢子的荧光观察,结果表明:被测转化子基因组中确实整合了目的片段,成功获得了橡胶树尖孢炭疽菌菌株CHY-1绿色荧光蛋白标记转化子。

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