多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌

作者：石晓路; 扈庆华; 张佳峰; 李庆阁; 王冰; 林一曼; 庄志雄; 刘小立; 张顺祥

来源：中华流行病学杂志, 2006, 27(12): 1053-1056.

DOI：10.3760/j.issn:0254-6450.2006.12.012

• 沙门菌
• 志贺菌
• 多重实时聚合酶链反应
• 同步检测 Salmonella
• Shigella
• Multiplex real-time polymerase chain reaction
• Simultaneous detection

目的建立改良分子信标-多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法,应用于食源性致病菌的快速诊断。方法根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因,分别设计一对引物和改良分子信标探针,用同色荧光标记,用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,加入沙门菌检测体系中,建立三重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果改良分子信标-多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69-93 fg／μl,菌液灵敏度为32-64 CFU／ml或1-2 CFU／PCR反应体系,无交叉反应。该反...

• 出版日期2006
• 单位深圳市疾病预防控制中心; 生命科学学院; 厦门大学