鞘内注射miR-125b mimic抑制小胶质细胞NLRP3炎症体激活减轻缺血再灌注损伤后的炎症反应

作者：王赫; 陈凤收; 马虹^*

来源：中国医师杂志, 2021, 23(04): 553-557.

• 注射,脊髓
• miR-125b
• 小神经胶质细胞
• 再灌注损伤
• NLRP3炎性体

目的观察和探讨鞘内注射miR-125b mimic对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后小胶质细胞活化和神经炎症反应的影响及机制。方法 120只SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组,鞘内注射生理盐水)、损伤组(IR组,鞘内注射生理盐水)、mimic组(IR+鞘内注射miR-125b mimic)和control组(IR+鞘内注射miR-125b control)。Sham组仅开胸暴露主动脉弓而不夹闭,其余各组使用动脉夹夹闭主动脉弓14 min,再移除动脉夹制备SCIRI模型。各组大鼠术前给予连续3 d鞘内注射,每天1次。Iba-1作为小胶质细胞特异性标记物,损伤后48 h采用免疫荧光法观察小胶质细胞的形态并计数活化的细胞数量;双免疫荧光观察Iba-1和NOD样受体pyrin结构域含3(NLRP3)在细胞的分布。Western blot法测定脊髓组织中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1蛋白含量;ELISA法测定炎症因子IL-1β含量。结果损伤后48 h,Sham组脊髓背角内小胶质细胞多为分支样形态,未见高Iba-1荧光信号表达;IR组和control组可见大量小胶质细胞形态为变形虫样,且高Iba-1荧光信号的细胞数量明显增加;而mimic组中小胶质细胞形态为分支样和变形虫样混杂,高Iba-1荧光信号的细胞数量较IR组明显降低(P<0.05)。双免疫荧光法显示NLRP3主要分布于高Iba-1荧光信号的小胶质细胞上。与Sham组相比,IR组脊髓组织中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白表达均明显增加(P<0.05)。与IR组相比,mimic组明显降低脊髓中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白表达(P<0.05)。而control组与IR组的上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鞘内注射miR-125b mimic通过抑制SCIRI引起的小胶质细胞活化,进而减少脊髓组织中NLRP3炎症体表达,发挥有效的抗炎作用。

• 出版日期2021
• 单位中国医科大学附属第一医院