东北黑熊粪肠球菌PCR检测方法的建立及应用

作者：向碧琪; 秦晓东; 鲁承; 孙福亮

来源：中国兽医科学, 2016, (06): 743-748.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.06.012

• 东北黑熊
• 粪肠球菌
• PCR Northeast black bear
• Enterococcus faecalis
• PCR

为建立一种基于细菌16S r DNA的粪肠球菌PCR检测方法,用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例,通过死亡黑熊脏器中提纯的粪肠球菌测序结果与NCBI中的粪肠球菌16S r DNA序列(登录号:NZ_AJXO01000024.1)的比对,设计了1对特异性PCR引物,并对PCR反应条件、敏感性和特异性进行了测定。结果表明,扩增条带与预期的产物大小一致,经过测序结果分析,证明该条带为目的条带,其他种属的菌株未见条带;并且当引物工作剂量为0.2 L、酶工作剂量为0.15 L就可以扩增出清晰的目的条带,该方法的最小检出量为86 CFU;通过对13头份来自延边熊场的患病(4头)和健康(9头)黑熊粪便检测...

• 出版日期2016
• 单位延边大学