摘要

目的体外评价壳聚糖/肝素(Chi/Hep)共价包被先天性心脏病介入封堵材料的生物相容性。方法在南京医科大学第一附属医院心血管内科于2005年11月至2006年10月,通过体外实验检测Chi/Hep共价包被镍钛合金片的血液相容性和细胞相容性。实验分成血液对照组、未包被组、基础包被组、Chi/Hep包被组,其中按肝素质量浓度又分为低(0.1mg.mL-1)、中(1mg.mL-1)、高(10mg.mL-1)3个剂量组。Chi/Hep共价交联于试验用镍钛金属表面,(1)血液相容性实验:通过血液溶血试验,动态人全血接触试验评价其红细胞毒性及抗栓性能,扫描电子显微镜观察镍钛金属表面血小板粘附、聚集。(2)细胞相容性:利用纤维连接蛋白、Ki67免疫荧光标记人脐静脉内皮细胞(HUVECs)观察其细胞毒性。结果(1)血液相容性实验:实验各组红细胞、白细胞、血小板计数均在正常范围内,且组间比较差异无显著性意义,各实验组溶血率均小于5%。Chi/Hep包被组部分凝血活酶活化时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)均明显延长,血液对照组、未包被组及基础包被组两两比较差异无显著性意义,不同质量浓度肝素包被之间差异亦无显著性意义(APTT、PT方差均齐LSD、SNK法检验,TT方差不齐Dunnetts法检验P<0.05)。扫描电镜结果显示,Chi/Hep包被组金属表面少量血小板粘附。(2)细胞相容性实验:经过与HUVECs72h孵育,金属片边缘细胞生长、移行良好,无细胞变形;Fn免疫荧光标记HUVECs,发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs粘附顺序如下:基础包被组>未包被组>Chi/Hep组;Ki67免疫荧光标记HUVECs,随机双盲法计数细胞发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs增殖顺序如下:基础包被组=未包被组>Chi/Hep组(P<0.01)。结论体外观察Chi/Hep共价包被镍钛金属有良好抗血栓作用,但抑制内皮细胞粘附、增殖。

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