通过染色体整合表达古菌乙酰化酶合成N-末端乙酰化胸腺肽β4

作者:曹赛; 戴红梅; 孙旭; 颛孙丹丹; 和金周; 司信喜; 李树龙; 方宏清; 陈惠鹏; 谢达平; 周长林
来源:中国科学:生命科学 , 2011, (10): 1008-1015.

摘要

胸腺肽β4(Tβ4)是N-末端乙酰化的43肽,具有多种重要生物学功能.其生物合成存在两大难点,即乙酰化修饰和小分子肽的表达.本研究发现来自古菌Sulfolobus solfataricus的乙酰化酶ssArd1可以催化Tβ4的N-末端乙酰化修饰.利用Red同源重组技术将ssArd1基因表达盒整合至E.coli BL21(DE3)染色体的lpxM位点上,构建了可以实现Tβ4N-末端乙酰化修饰的新型宿主E.coli BDA.将Tβ4编码基因融合在改造的微型Spl DnaX Intein的N端,并在Intein的C端添加His标签,构建了表达载体pET-Tβ4-Intein.在E.coli BDA中...