禽网状内皮组织增生病病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：李凯; 高宏雷; 高立; 祁小乐; 高玉龙; 徐延伟; 王笑梅

来源：中国兽医科学, 2010, (11): 1137-1141.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.11.014

• 禽网状内皮组织增生病病毒
• 荧光定量聚合酶链反应
• TaqMan探针 reticuloendotheliosis virus
• real-time PCR
• TaqMan probe

根据GenBank中禽网状内皮组织增生病病毒(REV)基因组序列设计1对针对REVgp90基因的引物和1条特异性TaqMan探针,建立了一种快速检测REV病毒载量的TaqMan荧光定量PCR方法。通过对反应条件和反应体系的优化,使得该方法在1×101～1×108copies/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度达到10copies/μL,是常规PCR方法的100倍,该方法与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复性试验变异系数均小于2%。用REV HLJR0901株人工感染1日龄SPF雏鸡,定期剖检,对感染鸡体内各器官的病毒分布及载量进行检测,结果表明,在肝、脾、法氏囊、胸腺和腺胃中均可检测到病...

• 出版日期2010
• 单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室