大鼠IL-12基因双亚基真核表达质粒的构建及表达

作者：林健; 王伟民; 徐如祥; 姜晓丹; 张宏斌; 武婕; 王捷

来源：中华神经医学杂志, 2007, (07): 653-656.

• 自细胞介素12
• 质粒
• 神经胶质瘤
• 9L细胞 Interleukin 12
• Plasmid
• Glioma
• 9L cell

目的构建双亚基共表达的大鼠白细胞介素12(rIL-12)基因真核表达载体质粒。方法用Trizol提取大鼠腹腔巨噬细胞总RNA,RT-PCR方法分别获取rp40和rp35两个亚基的cDNA,依次克隆入pcDNA3.1(-)/myc-His A质粒中,以脊髓灰质炎病毒的内核糖体进入位点连接双亚基,构建成双顺反子真核表达载体质粒pcDNA3.1/rIL-12。用电转染法将构建的重组质粒转染大鼠胶质瘤9L细胞,G418筛选单克隆细胞株,ELISA法检测其培养上清rIL-12(p70)蛋白含量,同时抽提细胞RNA,RT-PCR方法检测rp40、rp35基因在9L/rIL-12细胞中的表达。结果所得rp4...

• 出版日期2007
• 单位南方医科大学; 广州军区广州总医院