农杆菌介导几丁质酶及β-1,3-葡聚糖酶基因转化半夏的研究

作者：金波; 蒋福升; 余美荣; 陈铌铍; 丁志山

来源：中国中药杂志, 2009, (14): 1765-1767.

• 半夏
• 内切几丁质酶
• -&beta
• 1,3-葡聚糖酶
• 遗传转化
• 农杆菌介导

目的:将木霉来源的内切几丁质酶以及β-1,3-葡聚糖酶基因片段转入半夏,使其获得抗真菌感染的特性。方法:以半夏外植体为受体,潮霉素磷酸转移酶Hpt为筛选标记,采用农杆菌介导法将内切几丁质酶基因ech42、葡聚糖酶基因gluc78以及2种基因的组合pCAMBIA(ech42+gluc78)进行遗传转化获得转化再生植株,通过PCR,RT-PCR检测转化结果。结果:经PCR,RT-PCR检测,表明3种外源基因已成功转化半夏,并在转录水平得到表达。连续多代的PCR追踪检测证实外源基因已遗传至T5代。结论:带有ech42,gluc78,pCAMBIA(ech42+gluc78)表达载体的根癌农杆菌可以分别转化半夏,并表达出相应的RNA,进行稳定遗传。

• 出版日期2009-7-15
• 单位浙江中医药大学