大豆GmNHX3基因克隆及遗传转化载体的构建

作者：张继星; 王晓宇; 陈永胜; 黄凤兰; 李国瑞

来源：吉林大学学报(理学版), 2012, 50(02): 365-370.

DOI：10.13413/j.cnki.jdxblxb.2012.02.018

• 大豆
• Na+/H+逆向转运蛋白
• 载体构建

利用RACE(rapid-amplification of cDNA end)方法,以大豆叶片提取总的RNA为模板克隆了大豆Na+/H+逆向转运蛋白(Glycine max Na+/H+antiporter,GmNHX)基因,并将其连接到表达载体PBI121中,构建重组表达载体PBI121-NHX3.分析结果表明:该基因的ORF为1 503 bp,推测编码501个氨基酸.与所选取的10种植物同类蛋白氨基酸序列进行对比,一致性为72%～94%,并具有真核生物单价阳离子(氢离子)反向转运蛋白典型的结构域,将该基因命名为GmNHX3,GenBank接收号为JN872904.通过PCR和酶切鉴定,PBI121-NHX3构建成功.

• 出版日期2012
• 单位吉林大学; 内蒙古民族大学; 生命科学学院