抗盐酸克伦特罗人源ScFv抗体筛选与鉴定

作者：马巍娜; 贾雷立; 刘雪林; 宋宏彬; 高志贤; 钟彦伟; 张传福; 徐元勇

来源：中国公共卫生, 2009, (03): 287-288.

• 噬菌体表面展示技术
• 盐酸克伦特罗
• 人源单链可变区抗体(ScFv) phage display technique
• clenbuterol(CLB)
• ScFv phage antibody

目的筛选盐酸克伦特罗(CLB)人源单链可变区(ScFv)抗体,为研究快速检测试剂(盒)提供基础依据。方法采用噬菌体表面展示技术,以CLB作为抗原,从噬菌体单链可变区抗体库中经过3轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选抗CLB的60个克隆,利用酶联免疫吸附法(ELISA)、交叉反应及竞争抑制实验,对其进行免疫学检测和鉴定,获得与CLB结合活性较强的ScFv阳性克隆,从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经酶切鉴定SfiⅠ/NotⅠ后,亚克隆到pCANTAB5E载体;转化大肠埃希菌XL1-B lue,提取质粒进行DNA序列测定;并对CLB ScFv的编码基因序列分析。结果经过筛选60个克隆中有15株克...

• 出版日期2009
• 单位解放军第302医院; 中国人民解放军疾病预防控制所; 中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所