埃博拉病毒VP40蛋白的原核表达及其抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：盖微微; 郑学星; 薛向红; 冯娜; 王化磊; 王铁成; 赵永坤; 黄耕; 高玉伟; 杨松涛; 夏咸柱

来源：中国病原生物学杂志, 2013, (09): 782-786.

DOI：10.13350/j.cjpb.2013.09.006

• 埃博拉病毒
• 原核表达
• VP40蛋白
• Western blot
• 间接ELISA Ebola virus
• prokaryotic expression
• VP40protein
• Western blot
• indirect ELISA

目的以埃博拉病毒(EBOV)VP40基因原核表达产物为抗原建立检测埃博拉出血热抗体的间接ELISA方法。方法在分析EBOV VP40基因稀有密码子(大肠埃希菌系统)的基础上去除5′和3′端稀有密码子,合成VP40基因,构建VP40蛋白原核表达载体pET22b-VP40,并转化至BL21(DE3)菌,在1.0mmol/L IPTG和37℃条件下诱导表达目的蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。以纯化蛋白为抗原,建立检测埃博拉出血热抗体的间接ELISA方法。结果成功构建重组质粒pET22b(+)-VP40,表达的VP40蛋白经SDS-PAGE鉴定分子...

• 出版日期2013
• 单位吉林农业大学; 军事医学科学院军事兽医研究所