新型基因重组&alpha;-半乳糖苷酶工程菌菌种稳定性研究

高红伟; 李素波; 艾雪; 李妙; 王颖丽; 让文亮; 季守平; 宫锋

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2011.07.023

摘要

观察脆弱类杆菌来源的新型重组α-半乳糖苷酶工程菌菌株的遗传稳定性。在有选择压力(Kan+)条件下,将重组α-半乳糖苷酶工程菌菌株在LB固体培养基上采用划线法连续传60代,每隔20代取样保存菌种,最后同时进行菌体形态、生长速度和抗生素抗性、平板传代及诱导过程中的质粒稳定性、限制酶切图谱、测序、表达量和酶活力检测。结果表明细菌形态、生长速度和抗生素抗性等与原始种子库无明显差异;LB固体培养基上传60代后质粒稳定性接近100%,但诱导过程中质粒易丢失。第20、40和60代提取质粒进行酶切检查,酶切图谱没有改变。DNA测序未见α-半乳糖苷酶基因变异。原代菌株及第20、40和60代菌株经诱导培养,其α-...

出版日期2011
单位中国人民解放军军事医学科学院

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更新时间：2019-09-17 06:07

新型基因重组α-半乳糖苷酶工程菌菌种稳定性研究

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