麻疯树JcFATA基因干涉表达载体构建和功能初步分析

作者：刘颖; 刘国选; 黄川腾; 杨亚利; 唐家年; 何春英; 林诗婉; 高美芳; 吴东霖; 陈建平

来源：农业生物技术学报, 2018, 26(05): 899-910.

DOI：10.3969/j.issn.1674-7968.2018.05.017

• 麻疯树
• 麻疯树脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A基因(JcFATA)
• RNA干涉(RNAi)
• 拟南芥转化
• 脂肪酸

植物脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A(fatty acyl-acyl carrier protein thioesterase,FATA)是脂肪酸积累过程中的关键酶,直接调控脂肪酸的含量与组成。目前有关麻疯树(Jatropha curcas)FATA基因(JcFATA)(Gen Bank登录号:EU267122.2)的功能研究还未见报道。本研究首先构建JcFATA基因RNA干涉(RNA interference,RNAi)表达载体,进行下调表达研究,以麻疯树叶片cDNA为模板,克隆出JcFATA基因正向片段FATA1(439 bp),然后将其连接到含内含子的干涉表达载体p YLRNAi.2-35S上,构建JcFATA基因RNAi表达载体pYLRNAi.2-35S-FATA1-FATA2;再通过电击法将其转入到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105感受态细胞中,然后利用花序侵染法进行拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传转化,最后通过PCR检测和Southern blot验证。对转基因拟南芥植株进行了表型观察、表达量分析和脂肪酸的含量测定,结果显示,JcFATA基因干涉表达的转基因植物生长发育可能受到抑制。本研究结果可为进一步探讨JcFATA基因的功能及该基因在麻疯树遗传改良中的应用提供理论依据。

• 出版日期2018
• 单位广东海洋大学; 嘉应学院医学院; 海南省林业科学研究所