摘要

目的:制备苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒PK-1抗体,利用抗体分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。方法:根据pk-1基因序列设计引物,扩增全长序列,将其克隆到原核表达载体pMal-c2x。利用原核表达目的蛋白质,将产物进行亲和层析,获得纯化蛋白。将纯化的融合蛋白免疫兔子制备抗血清,利用PK-1抗血清进行免疫荧光分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。结果:成功原核表达并纯化PK-1融合蛋白,获得PK-1兔多克隆抗血清,并确定了PK-1在病毒的感染过程的亚细胞定位。结论:在杆状病毒感染后的16h,PK-1主要定位在细胞质中,随后扩散到细胞核中,在感染后24h分布在整个细胞中,到感染后48~72...